抗體蛋白質(zhì)測(cè)序只是簡(jiǎn)單地定義未知抗體的氨基酸序列。 在抗體蛋白的從頭測(cè)序中使用質(zhì)譜法使得在沒有可用的細(xì)胞系或事先知道 DNA 序列的情況下執(zhí)行此操作成為可能。
蛋白質(zhì)分子的質(zhì)譜測(cè)量作為測(cè)序技術(shù)的基礎(chǔ),它只需要0.2毫克的蛋白質(zhì)。分析和報(bào)告之間的時(shí)間已縮短至數(shù)周。詳細(xì)報(bào)告包括重鏈和輕鏈序列、支持報(bào)告序列的相關(guān)數(shù)據(jù)以及對(duì)蛋白質(zhì)分子的其他評(píng)論。
對(duì)抗體使用從頭測(cè)序的好處包括:
如果產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤丟失或不可用,抗體本身仍然可以通過重組復(fù)制,只需使用 0.2 mg 單克隆抗體蛋白。如果連這么多都沒有,可能還有其他辦法。
使用具有優(yōu)化設(shè)置的高分辨率質(zhì)譜技術(shù) ,以及用于抗體從頭測(cè)序的專有軟件,意味著可以對(duì)整個(gè)蛋白質(zhì)從 n-term 到 c-term 進(jìn)行測(cè)序,包括每個(gè)氨基酸。
由于在單獨(dú)肽的多個(gè)質(zhì)譜讀數(shù)中獲得了強(qiáng)信號(hào)峰特征,因此可以正確識(shí)別序列中的每個(gè)氨基酸。
基于質(zhì)譜的技術(shù)可用于測(cè)序所有類型的抗體,無論是 IgA、IgM、IgG、IgY、Fab、ScFv 等,來自所有類型的動(dòng)物物種,包括小鼠、大鼠、兔子和倉(cāng)鼠,除了來自人類。 它甚至已被用于對(duì)受污染或結(jié)合的抗體或成對(duì)具有不同輕鏈的抗體進(jìn)行測(cè)序。
該技術(shù)的目標(biāo)是完美的質(zhì)譜蛋白質(zhì)測(cè)序。 這導(dǎo)致人們不斷努力生產(chǎn)優(yōu)化的工作流程和軟件,以便對(duì)每種蛋白質(zhì)進(jìn)行測(cè)序,無論多么困難,并保持最高質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。
這種抗體從頭測(cè)序的使用通常會(huì)導(dǎo)致檢測(cè)到測(cè)序中的意外差異或蛋白質(zhì)分子上的新糖基化位點(diǎn),而 DNA 測(cè)序無法檢測(cè)到這些差異。
用于從頭抗體測(cè)序的質(zhì)譜方法僅適用于等待測(cè)序的一個(gè)或數(shù)百個(gè)抗體分子。
在典型情況下,該技術(shù)需要 0.2 mg 或更多純度至少為 95% 的單克隆抗體。 分析后,可交付成果包括一份詳細(xì)的報(bào)告,其中給出了重鏈和輕鏈的完整序列,以及支持結(jié)果的相關(guān)數(shù)據(jù),以及任何其他有用的評(píng)論,例如觀察抗體的意外變化。 所需時(shí)間通常為收到樣品后 1-2 周。
輝駿生物是抗體蛋白質(zhì)測(cè)序技術(shù)的領(lǐng)導(dǎo)者,團(tuán)隊(duì)專注于基于質(zhì)譜的蛋白質(zhì)組學(xué)領(lǐng)域,開發(fā)了無需訪問生產(chǎn)細(xì)胞系即可直接對(duì)抗體蛋白質(zhì)進(jìn)行測(cè)序的技術(shù)。 輝駿生物抗體蛋白測(cè)序服務(wù)可在常規(guī)基礎(chǔ)上對(duì)任何給定的抗體蛋白進(jìn)行準(zhǔn)確測(cè)序,保證100%測(cè)序準(zhǔn)確度,對(duì)輕鏈的測(cè)序誤差范圍在+/-1.2Da,對(duì)重鏈的誤差范圍在+/-1.8Da,保證交付抗體活性,不成功不收費(fèi)。




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